酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 表達(dá)分析
簡(jiǎn)要描述：
酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 表達(dá)分析INVSc1菌株是一種快速生長(zhǎng)的釀酒酵母菌，是一款非常理想的重組蛋白表達(dá)菌株，但因孢子生成能力弱，不適合用于基因分析研究。配套的質(zhì)粒有：pYES3/CT、pYC 2、pYES2系列。
產(chǎn)品時(shí)間：2026-06-12
打印當(dāng)前頁(yè)INVSc1 Chemically Competent Cell
酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
INVSc1 Chemically Competent Cell 酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | MF2372-1000UL | 10×100μl | 320 |
MF2372-5000UL | 50×100μl | 1360 |
產(chǎn)品包裝
組分編號(hào) | 組分名稱 | 保存 | 貨號(hào)（規(guī)格） | |
MF2372-1000UL | MF2372-5000UL | |||
MF2372-A | INVSc1 Chemically Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2372-B | pYES2 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2372-C | Carrier DNA (10μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2372-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
保存與運(yùn)輸方法
保存：其中感受態(tài)細(xì)胞按標(biāo)簽注明置于-80℃保存，三個(gè)月有效。其他組分按照標(biāo)簽注明保存，一年有效。
運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸。
產(chǎn)品描述
INVSc1菌株是一種快速生長(zhǎng)的釀酒酵母菌，是一款非常理想的重組蛋白表達(dá)菌株，但因孢子生成能力弱，不適合用于基因分析研究。配套的質(zhì)粒有：pYES3/CT、pYC 2、pYES2系列。當(dāng)這些質(zhì)粒（比如：pYES2）與INVSc1菌配套使用，會(huì)激活pYES2質(zhì)粒上的GAL1啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而啟動(dòng)下游重組蛋白的表達(dá)。INVSc1是二倍體細(xì)胞，是組氨suan、亮氨suan、色氨suan、尿mi啶缺陷型菌株，可直接通過(guò)PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)入INVSc1細(xì)胞內(nèi)。質(zhì)粒pYES2的篩選標(biāo)志為URA，可用SD-URA平板進(jìn)行篩選。
本品為經(jīng)特殊工藝制備的INVSc1酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，用pYES2質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率＞104 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存三個(gè)月。
基因型
MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
注意事項(xiàng)
1） 最好在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。
2） 轉(zhuǎn)化高濃度質(zhì)粒可相應(yīng)減少用于涂板的菌量。同時(shí)轉(zhuǎn)化2-3種質(zhì)粒可適當(dāng)增加質(zhì)粒的用量。
3） INVSc1對(duì)高溫敏感，最適生長(zhǎng)溫度為27-30℃，一旦高于31℃，生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化率都呈指數(shù)下降。
4） 酵母菌在缺陷培養(yǎng)基上生長(zhǎng)速度比YPDA培養(yǎng)基慢，營(yíng)養(yǎng)缺陷成分越多，生長(zhǎng)越慢，以轉(zhuǎn)化涂板為例：涂YPDA平板于29℃，48h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆；涂SD單缺平板于29℃，48-60h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆；涂SD雙缺平板于29℃，60-80h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆；涂SD三缺或四缺平板于29℃，80-90h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆；
5） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1） 取100 µl冰上融化的INVSc1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5 µg，預(yù)處理的Carrier DNA（95-100℃水浴3 min或95℃金屬浴5min，快速冰浴3min。重復(fù)一次。處理完快速插入冰中，待用。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用槍吹打幾次充分混勻，30℃水浴30 min（在15min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻）。
2） 之后將管子放42℃水浴15 min（在7.5min時(shí)翻轉(zhuǎn)6-8次混勻）。
3） 5000 rpm離心40s棄上清，用400 µl ddH2O重懸沉淀，離心30s棄上清。
4） 用50 µl ddH2O重懸，涂板，放入29℃培養(yǎng)48-96 h。
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貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
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MF2501-200T | Yeast Transformation Kit酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 | 200T |
MS6303-350G | YPDA Agar Medium YPDA瓊脂培養(yǎng)基 | 350g |
MS6304-250G | YPDA Medium YPDA液體培養(yǎng)基 | 250g |
MS6367-5L | SD/-Ura Broth酵母缺陷型培養(yǎng)基（肉湯） | 10×0.5 L |
MS6368-5L | SD/-Ura with Agar酵母缺陷型培養(yǎng)基（瓊脂） | 10×0.5 L |
MS6319-10G | DO Supplement -Ura | 10g |
MS6305-100G | YNB Without Amino Acids酵母氮源基礎(chǔ)（無(wú)氨基酸） | 100g |
附錄I培養(yǎng)基配制
一、質(zhì)粒篩選用培養(yǎng)基：SD/-Ura培養(yǎng)基配制（1L）
酵母氮源基礎(chǔ)（YNB） 6.7g
葡萄糖 20g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 適量（詳見(jiàn)說(shuō)明書）
補(bǔ)水到1L，用1M NaOH調(diào)pH至5.8。
瓊脂粉（Agar） 20g（僅限固體培養(yǎng)基）
121℃，15min高壓滅菌。
二、蛋白誘導(dǎo)用培養(yǎng)基：SGR/-Ura培養(yǎng)基配制（1L）
酵母氮源基礎(chǔ)（YNB） 6.7g
氨基酸缺陷混合物（DOsupplement-Ura for pYES2） 適量（詳見(jiàn)說(shuō)明書）
補(bǔ)水到800 mL，用1M NaOH調(diào)pH至5.8。
121℃，15min高壓滅菌。
待培養(yǎng)基溫度冷卻到55℃左右，加入已過(guò)濾的碳源：100ml 20%半乳糖，100m 10%棉子糖。混勻即可。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠(chéng)為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供良好產(chǎn)品。